凝胶渗透色谱测试公司_凝胶渗透色谱测试制样

凝胶渗透色谱比起其他测试分子量的仪器有何优势，制样要注意什么

方便、准确、速度快。

测定分子量一般就是凝胶色谱和粘度计，然后再折算成道尔顿分子量，凝胶给出的信息丰富，不仅能给出重均分子量，还能给出数均、z均、分子量分布系数等信息。

制样要注意不要有大颗粒不溶物堵塞色谱柱，进样前要用0.45um滤膜过滤，还要注意浓度不可太大，不能超过柱子耐受力，也不可太小，让检测器检测不到也不好。

溶解时间也要统一，一个小时和一天的可能结果会有差别，根据样品性质使用保护柱，振摇也要注意，这些都是为了防止某些脆弱的分子被弄裂了，降低了分子量，增大了分布系数。

凝胶渗透色谱对分析样品的要求

你做凝胶渗透色谱是不是想测分子量？还是说要做分离纯化？还是其他目的？

1、如果测试分子量建议用通用检测器，你的样品应该是多组分的一类物质，用紫外的话很难兼顾到每一个的组分的紫外吸收强度。样品没有特殊要求，只要你选择合适的色谱条件就可以的。

2、你如果做分离纯化的话，那你最好先筛出最佳的分离条件，然后在实验。样品的上样量不要太大，避免过载。

3、其他目的的实验就看你具体用途了，反正GPC没法跑梯度的（我是没有见过有人跑梯度），你得自己清楚样品的性质，是否对色谱柱有影响。

凝胶渗透色谱的基本原理

凝胶具有化学惰性，它不具有吸附、分配和离子交换作用。让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱，柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙（较大）和粒子内的通孔（较小）。当聚合物溶液流经色谱柱（凝胶颗粒）时，较大的分子（体积大于凝胶孔隙）被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多；中等体积的分子可以渗入较大的孔隙中，但受到较小孔隙的排阻，介乎上述两种情况之间。 经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的在前面（即淋洗时间短），相对分子质量小的在后面（即淋洗时间长）。自试样进柱到被淋洗出来，所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。 当仪器和实验条件确定后，溶质的淋出体积与其分子量有关，分子量愈大，其淋出体积愈小。

（1） 体积排除

（2）限性扩散

（3） 流动分离 由于GPC对聚合物的分离是基于分子流体力学体积，即对于相同的分子流体力学体积，在同一个保留时间流出，即流体力学体积相同。

两种柔性链的流体力学体积相同：

[η]1M1=[η]2M2

k1M1α1+1=k1M2α2+1

两边取对数：lgk1+(α1+1)lgM1=lgk2+(α2+1)lgM2

即如果已知标准样和被测高聚物的k、α值，就可以由已知相对分子质量的标准样品M1标定待测样品的相对分子质量M2。

凝胶渗透色谱比起其他测试分子量的仪器有何优势，制样

排阻色谱的分辨率是很低的。不知道你的样品是不是蛋白质、多肽类的？如果是的话，一般都在280nm检测，灵敏度也不算高，这是一方面。对一根柱子来说，排阻的分子量有一个范围，看起来很宽，但对大分子物质来说，其实不然，超出范围的要么保留低